色综合激情,韩国午夜免费福利,国产成人夜色,精品国产1区2区了区

歡迎來上海昊擴科學器材有限公司!我們將為您提供周到的服務!
產(chǎn)品分類

Product classification

技術文章
首頁 > 技術文章 > 生物藥電荷異構體分析難題如何破?MauriceFlex +MS來解鎖!

生物藥電荷異構體分析難題如何破?MauriceFlex +MS來解鎖!

發(fā)布日期:2025-06-09      瀏覽次數(shù):168

在生物藥研發(fā)中,抗體的電荷異構體直接影響藥物療效與安全性。離子交換色譜(IEX)操作繁瑣且分辨率有限,傳統(tǒng)的毛細管電泳-質譜聯(lián)用(CE-MS)常因高濃度緩沖液與ESI不兼容,導致數(shù)據(jù)偏差?!禘lectrophoresis》期刊發(fā)布的一項研究利用MauriceFlex進行電荷異構體的快速分離,并進行質譜分析,為這一難題提供了高效的解決方案。

生物藥電荷異構體分析難題如何破?MauriceFlex +MS來解鎖!


研究以單克隆抗體Matuzumab為測試對象,通過MauriceFlex儀器實現(xiàn)了電荷異構體的快速分離和離線質譜分析。結果顯示,MauriceFlex不僅能夠高效地分離電荷異構體,還能與質譜無縫對接,提供高分辨率的分析結果。這種方法不僅克服了傳統(tǒng)方法的局限性,還顯著提高了分析的準確性和可靠性,為單克隆抗體的深層表征提供了全新的視角。



01. 研究方法

(1) 毛細管等電聚焦電泳(icIEF):使用MauriceFlex儀器進行icIEF分析,分為分析型和制備型(餾分收集)兩種模式。分析型icIEF建立基礎分離條件,制備型icIEF通過增加樣品濃度和添加精氨酸優(yōu)化餾分收集,通過化學遷移技術將電荷異構體餾分收集至96孔板。

(2) 熒光檢測:通過熒光測量確定96孔板中含有蛋白質的孔位。

(3) 質譜分析(MS):使用高分辨率質譜儀對收集的電荷異構體進行分析,解析其結構特征。



02. 研究結果

(1) 方法適用性驗證

使用MauriceFlex儀器僅用1天完成了從分析型cIEF轉化為制備型餾分收集的方法開發(fā),并在2.5小時內完成了高純度電荷異構體餾分收集。結果發(fā)現(xiàn)分析型與制備型cIEF的峰數(shù)量相同,方法轉化后分離效果良好,表明從分析到制備的方法轉換可靠,為后續(xù)質譜分析提供了可靠的樣本。

生物藥電荷異構體分析難題如何破?MauriceFlex +MS來解鎖!

圖1 Matuzumab的分析型icIEF(上)與制備型icIEF餾分收集電泳圖(下)對比


(2) 方法穩(wěn)定性評估

為了評估餾分收集方法的穩(wěn)定性,將Matuzumab樣品在制備型icIEF模式下獨立收集三次(Run1- Run 3),通過分析型icIEF對每次收集的餾分進行驗證(圖2),結果顯示各電荷異構體在不同分離批次中的峰形和位置高度一致,表明MauriceFlex制備型icIEF(餾分收集)具有良好的重現(xiàn)性和準確性。盡管三次實驗餾分在96孔板中分布位置存在微小偏移(1-2孔),但通過分析型icIEF驗證可輕松匹配對應餾分,驗證了餾分收集過程的穩(wěn)定性。

生物藥電荷異構體分析難題如何破?MauriceFlex +MS來解鎖!

圖2 Matuzumab樣品三次餾分收集后的分析型icIEF結果


(3) 質譜分析

使用高分辨率質譜儀檢測未分離的Matuzumab抗體和經(jīng)過MauriceFlex分離的餾分,發(fā)現(xiàn)未分離的樣品質譜信號重疊嚴重,而經(jīng)MauriceFlex分離的餾分在質譜圖上顯示出更清晰和特異的峰,表明MauriceFlex有效地富集了特定的電荷異構體。通過質譜成功鑒定了包括C末端賴氨酸異構體(K2、K1、K0)糖基化異構體(FA2和A2G1),這些發(fā)現(xiàn)對于理解單克隆抗體的結構和功能具有重要意義。研究還發(fā)現(xiàn)了一些未報道過的酸性異構體,表明MauriceFlex餾分收集和質譜的分析方法能有效揭示復雜電荷異構體的結構信息。

圖3 非分餾樣品(上)與icIEF餾分(下)的質譜對比



03. 總結

作者以Matuzumab為測試對象,成功開發(fā)了分析型icIEF方法,并快速轉化為制備型icIEF方法,2.5小時內完成高純度電荷異構體餾分收集,質譜分析則清晰揭示了包括C末端賴氨酸異構體、糖基化異構體在內的多種電荷異構體,甚至發(fā)現(xiàn)了一些未報道過的酸性物質。MauriceFlex+MS聯(lián)用方法不僅克服了傳統(tǒng)方法的局限性,還顯著提高了分析的分辨率和準確性,為單克隆抗體的深層表征提供了全新的視角。




MauriceFlex全自動毛細管電泳分析與組分收集系統(tǒng)


(1) 一機智能:CE-SDS、Turbo CE-SDS、icIEF和icIEF組分收集多種模式卡盒即插即用,簡單易用

(2) 快速開發(fā):1-2天即可實現(xiàn)快速方法開發(fā),平臺方法易轉移

(3) 高效分離:數(shù)小時內即可分離和收集電荷異構體組分

(4) 應用自由:餾分收集后的樣本可兼容多種下游表征:質譜分析、肽圖分析、糖型分析、活性分析等等

(5) 適用廣泛:全自動表征生物大分子蛋白質藥物電荷異構體和分子量大小:單抗、雙抗、抗體偶聯(lián)藥物、重組蛋白、融合蛋白、病毒載體等多種類型樣品


* 參考文獻:Wittmann, Antonia et al. Evaluation of a cIEF Fractionation Workflow for Offline MS Analysis of Charge Variants of the Monoclonal Antibody Matuzumab. Electrophoresis. 2025;46(3-4):240-249.

* 本文轉載自「ProteinSimple」微信公眾號





   關于上海昊擴:

   上海昊擴科學器材有限公司成立于2019年,總部位于上海,是一家實驗室設備/耗材及分析儀器的專業(yè)服務商。公司致力于為生物、醫(yī)藥、物性檢測、化工分析、食品、工業(yè)生產(chǎn)等相關領域客戶提供國內外高科技專業(yè)設備以及技術咨詢服務。




Copyright © 2025 版權所有:上海昊擴科學器材有限公司  ICP備案號:滬ICP備20016915號-1  管理登陸  技術支持:化工儀器網(wǎng)   總流量:200682  網(wǎng)站地圖

在線客服 聯(lián)系方式

服務熱線

86-021-52261560

91麻豆香蕉精品国产一区二区三区| 欧美亚洲偷拍第一页| 少妇作爱3P| 国产欧洲在线| 日本女优黄色一区二区三区| 日韩无码分区一| 懂色av中文一区二区| AV色欲媚药春药中文字幕| 亚洲久久激情黄色| 久久AV-区| 这里只有精品一区二区三| 99久久精品黄色| 欧美一二三在线| 国产精品偷拍网| 日韩成人av手机免费在线| 蜜臀成人影片在线观看| 日本久久一级人妻电影| 日本性交一区一区三区| 台湾精品一区二区三区最新作品| 色YEYE综合视频| 妻互换精品| 视频 在线播放 成人 综合 在线| 亚洲图片欧美精品| 嗯嗯,啊嗯嗯要视频| 亚洲AV漫| 日韩欧美黄片91| 亚洲成人操爱操爱操爱| 中文字幕日产一区| 精品 在线| 亚洲日韩欧美国产二区| 极品久久露脸| 美日韩欧成人网| 操逼美女鸡巴九一91| 国产性生活网址| 欧美色图亚洲色图校园春色另类图片 | 久久久久极品少妇久久| 亚洲欧美日韩综合一区二区4K| 久久人人爽人人爽人人大片av| 亚洲综合图区国产| 国产精品麻豆蜜臀明星换脸XXX| 午夜成人免费福利网|